Con la jornada vamos muy desgraciados, entonces bueno, es así, los temas
son muy interesantes, los hemos comprimido mucho y es difícil abordar el
tema. Bueno, la segunda parte acerca de los sanitarios tiene dos
conferencias y la primera de esas dos conferencias va a hablar de la tinta,
se ha hablado de la situación de la comarca que está prácticamente
erradicada, digamos que la tinta mató todo lo que tenía que matar, todos
aquellos castaños que estaban en condiciones de contacto con humedad, lo
lo va a contar él, pero sigue siendo importante conocer esa enfermedad por
si se puede volver a hacer, no más notaciones. Entonces para ello va a
estar el tetraxa, Francisco José Cayoleza y también está firmada la
charla por Lourdes González. Bueno, pues os dejo también, vamos a
intentar las dos conferencias ser breves dentro de respetar nuestro tiempo,
pero vamos, adelante, muchas gracias. Buenos días, soy Francisco Arrayo,
soy técnico de ingeniería dentro de la dirección técnica y de la
dirección de imágenes de traxa y estoy trabajando desde el vivero de
Macedo Orense. La presentación... La presentación de hoy no soy yo el
autor, si el presentador, la autora es la doctora Beatriz Cuenca, que es
responsable de la línea de trabajos que han conducido a este proyecto. La
presentación es obtención de materiales de base de castaño resistentes a
fitófora cinamoni, producción a gran escala de materiales condensables de
reproducción de categoría cualificadora. Anticipar mis disculpas si por
algún término técnico me equivoco, pero bueno, de todas maneras, con
nosotros contamos con la presencia de Luis Ocaña, que es el impulsor de
investigación desde el vivero de Maceda a Galicia y a nivel nacional de
investigación desde la empresa en materiales forestales de reproducción y
de base. Voy a empezar por uno... Por las motivaciones que tuvo la empresa
de comenzar esta línea de trabajo, por una fase primera que denominamos
recati resistencia a castaños de pinca, que consistió en selección de
árboles resistentes o aparentemente resistentes. Y luego voy a escoger
metodologías, resultados y participantes de la segunda fase del recati,
recati 2, que va a ser el corazón del laberinto. Hay una... En Galicia hay
una alta... En Galicia hay una alta depresión de la especie por la acción
de enfermedades físicas, como la calcitóctora, e incluso afectando en los
últimos momentos a zonas de montaña. Hay una fuerte demanda de castaño
impulsada por los programas públicos de apoyo a la reproducción con
castaño y además el tráfico de todo que regula la comercialización y
uso de los materiales forestales de reproducción. Establece que los
materiales comercializados tienen que estar catalogados en el catálogo
nacional de materiales de base. Como todos sabréis, a grandes rasgos, la
pinca es una enfermedad que se despliega por dos horas de un hongo
homiceto. Afortunadamente afecta a las raíces. Se despliega a la base del
tronco y se ve convertido por el calor y la humedad. La humedad es
importante para su distribución por el suelo. Se planteó, la estrategia
del RECATI 1, se planteó que en aquellas zonas en las que la infección de
la albinta fuera muy intensa, sería doble de afectar a la humanidad. Se
planteó que mejor se mostraran árboles aparentemente resistentes. Se
cruzaron las zonas de regresión de Bowyer, la zona más afectada es la 1
de costa, 2 de costa norte y ladera oeste de las sierras, y así a zonas
más continentales con menos infección. La estrategia consistiría, por
tanto, en cruzar esa zonificación con el tronco y con parcelas de
Alimentario Forestal Nacional donde se tenían datos de daños. La
clasificación en el Alimentario era un poco abierta, se podían ver daños
abióticos, daños bióticos, por supuesto, de asométricos, de diámetros,
alturas, y con esa estrategia de cruce de información se establecieron una
serie de parcelas a prospectar. En una que los científicos utilizaron para
identificar árboles posiblemente resistentes fueron lo que ya he
comentado, y las zonas aproximadamente afectadas, según las distintas
referencias. Buscar árboles que hubieran estado en contacto con la
enfermedad tiempo, el diámetro normal mínimo era 50 centímetros, que
esos árboles aparentemente no estuvieran infectados actualmente por la
enfermedad. Y que los árboles se pusieran de buena forma, fueran
maderables, y los criterios son todos los otros de la manera. Se usaron,
como he dicho, el Alimentario Forestal de España, el Alimentario Forestal
Nacional, y luego cartografía, CTS y digital a todo el mundo del
territorio. Al final se han seleccionado entre 2.200 y 2.600, si no me
equivoco, 206 individuos y casi 19.000 hectáreas industriales. Lo que es
una gran cantidad de árboles. Seguramente, las clases de la metodología
del proyecto son testar la resistencia a través de ensayos de resistencia
para reducir esa colección de 206 clones y ver si efectivamente hay
susceptibilidad cero. La calcificación molecular de esa colección de
genotipos, de clones, para determinar si son sativa o si son híbridos. Se
tratan con características de resistencia, híbridos con castaños
asiáticos, y el establecimiento de partículas de ensayo de cara a la
catalogación en el Catálogo Nacional del Mar. Para poder hacer todo esto
es importante tener copias de los individuos y la primera base sería el
establecimiento de aquellos distintos individuos. Lo que se está haciendo
es un proceso de recogimiento, que son los individuos que recogieron
saquillas que se portaron en un clima de la rotación para hacer una
estabilización y meterlas en un ciclo de cultivo in vitro. En el que
tendría cuatro fases de proliferación o multiplicación desde el estante
inicial, la erogación, el reenraizamiento y finalmente la climatización.
Los estajes de resistencia fueron tres. Basados inicialmente y
cronológicamente en la bibliografía de los estudios de la Universidad de
Madrid, el deslizado inoculando varetas extintidas, el desaje de
inoculación en el sustrato y se propusimos un nuevo test in vitro de cara
a agilizar los tiempos de selección. Ya que en el desaje de inoculado al
sustrato se necesitaba multiplicar en el laboratorio el genotipo y luego
además aclimatar. No son directas sino que ha habido que hacerlas en el
sistema. Y ha tenido influencia importante el genotipo. Por otra parte, en
la parte de caracterización molecular se ha trabajado con la Universidad
de Santiago de Compostela en la utilización de microsatélites para
diferenciar los autóctonos de los asiáticos y por otra parte se ha hecho
una cosa a punto de single printing con rats para poder tener identificados
molecularmente cada uno de los genotipos. Esto se ha hecho con el Centro
Superior de Investigaciones Científicas. Una fase importante periférica
de cara a una modificación del uso ha sido la bioconservación en la que
se va a intentar conservar material aparentemente inoculado. Y es un
proceso óptimo hasta el momento en el que se pueda comercializar y a
partir de ahí explotar. Y por último, lo que ya hemos comentado, el
establecimiento de parcelas de ensayo. Que en un principio fueron seis pero
fueron de los españoles híbridos existentes desarrollados por la
administración. Y tres parcelas, unos españoles seleccionados en nuestro
programa que intentan cubrir desde zonas costeras a zonas continentales. Y
en el momento hay dos instalados de un año y un tercero en proyección de
instalación aquí en el Viollet. Por último, para poner en juego al
sector el material que se consiga, se cuenta con una producción a gran
escala por pescaquillado semiorbáceo que tiene menos costes que la
multiplicación in vitro y más rendimientos que el acodo. Por lo menos
nosotros estamos situados en una zona... Por eso necesitamos FOX forzado,
¿no? Los resultados de la fase 2, de los efectos que he comentado
anteriormente han sido la micropropagación para aquellos técnicos que se
han utilizado esos medios de cultivo que yo no conozco, pero que están
ahí. Se han conseguido 199 billones in vitro de los cuales 69 se han
perdido por contaminación con lo cual tenemos 130 ahora mismo en un
establecimiento satisfactorio. La tasa de multiplicación es baja de 0,4 o
1,5 pero lo que es el realizamiento y la supervivencia tiene porcentajes
más o menos admisibles. El 70% para el 67% de los clones y la
supervivencia a la aclimatación el 90%. En cuanto a los test de
resistencia, se comenzó por el test de saca extintiva con ramas adultas
procedentes directamente de los árboles seleccionados. Esto va a
generar... Y aunque se intentaba que ontogénicamente todos los tallos
tuvieran edades parecidas eso ha podido afectar a un ámbito. Se han
testado 135 genotipos y lo que se medía, para los que no lo conozcáis, es
la longitud de lesión sobre la estaca que produce un disco de vencerio con
sus controles. Los controles tenían... unos dos centímetros de zona
necrosada entonces todos aquellos genotipos con dos centímetros de zona
necrosada o próximos serían susceptibles de ser resistentes a la tinta.
De hecho, como decía antes, hay una correlación moderada entre ese test
de testa extintiva en los ranches con el progreso de la enfermedad del test
de inoculación al sustrato. Hemos identificado cuatro clones que son muy
promedores desde este test. Estos son los resultados de un primer test con
el material de campo. Estos son los resultados de un test en el que se han
inyectado las tacas de un año procedentes de planta in vitro con lo cual
la edad endocénica es más parecida. Y se han identificado... Este es
Trenata. Se han identificado cuatro clones que pueden ser resistentes. En
el test de inoculación al sustrato las variables medidas han sido
supervivencia por genotipos los tratamientos positivos de raíces y de
suelo de las plantas muertas para certificar que la muerte ha sido por
fitóctona y el progreso de la enfermedad en incremento del porcentaje de
plantas muertas. Otros parámetros utilizados son el nivel de daño
propuesto por el reino y también frecuencias de podredumbre frecuencias de
podredumbre en el cuello y raíz el nivel de podredumbre que es
básicamente la presión, si no me equivoco de raíces finas o raíces más
gruesas o en el núcleo de la cepa circunferencia de la podredumbre en el
cuello de la raíz ante una excepción el porcentaje de excepción afectado
y la longitud de la lesión en el cuello Los test de inoculación del
sustrato se han tenido que hacer progresivamente cada uno de los gráficos
presentados que corresponden a campañas de ensayo son unos siete y han
identificado como dado el tamaño de los ensayos no se podían restar todos
los árboles al tiempo por eso la progresión y en cada ensayo estaban
distintos clones aunque en algunos de ellos se mantenía un genotipo de
referencia Los cuadros azules corresponden a genotipos que han dado
resistencia comparada con la depredada Hay una correlación débil como
adelantaba antes al ranking por el test de inoculación del sustrato con el
ranking por el test de sacra extinguida que son un doce por ciento del
total de lo pesado Por último, en cuanto al test de resistencia se propone
o incorporamos en el laboratorio un test in vitro en el que lo que se
hacía era medir el progreso de la enfermedad como número de días desde
la inoculación hasta que se murieran o morían todos pero utilizar el
parámetro de días hasta alcanzar el 75% de los muertos para caracterizar
a los genotipos tanto los controles como los testados En este test también
se analizaba el hongo en raíz de cigallo para confirmar la muerte por
citóforo Así por tanto son tres gráficos En el de arriba se han
caracterizado los que no son sensibles Hacia el día 25 hay más del 75% de
muertes acumuladas Entre ellos está Casania sativa veis en la línea verde
Casania genata que está por debajo de las curvas donde se agrupan los
genotipos no sensibles Los clones sensibles los hemos caracterizado por
estar entre 25 y 50 días en el momento en el que alcanza el 75% de muertes
acumuladas Veis también sativa y veranata de referencia Y por último los
clones resistentes los hemos considerado aquellos en los que el porcentaje
de más del 75% de muertes se presentaban más allá del día 50 Esos
clones están en torno a Crenata Hay una correlación sin embargo El HS que
es un híbrido artificial clásico El Pontevedra Teos Pontevedra 42 y
Coruña 17 En el test se observa de sustrato son clasificados como
sensibles o muy sensibles son resistentes en el test de sustrato mientras
que en el test de in vitro son clasificados como sensibles o muy sensibles
Con lo cual el test de in vitro puede servir para hacer un barrido y
descartar los muy sensibles o los sensibles pero no para confirmar los
resistentes En cuanto al trabajo de caracterización molecular con él se
quería para conseguir saber si los genéticos seleccionados eran sativa o
híbridos pero también a la vez conocer el grado de introgresión de los
castaños asiáticos en las masas gallegas de sativa y bueno hacerse una
idea de la posibilidad de mejora valorando que si había familias
resistentes había una posibilidad de mejora pero si había una variación
dentro de poblaciones quizá se podría trabajar con las heredabilidades de
los caracteres de resistencia Se utilizaron dos poblaciones de dos vecinos
de procedencia de castaña sativa dos vecinos de procedencia de crenaca Se
utilizaron también una una procedencia de monísima y otra de cerní En
las de Crenaca una de ellas procedía de Navarra y se clasificó se agrupó
dentro de las poblaciones de sativa con lo cual sin llegar en vanidad el
ensayo creemos si que da una idea de que quizá la semilla utilizada estaba
polinizada además por estar en Navarra por sativas Por otra parte dos de
los genotipos seleccionados en el programa se agruparon en el subcluster de
Crenaca y eso da una idea de que puede haber un valor del 25% de
confirmamos que esa serie de genotipos son sativas y son eh resistentes En
cuanto a la bioconservación pues se han eh utilizado 19 genotipos de los
seleccionados eh 16 por duplicado 11 clones híbridos y especies puras y y
bueno pues la tasa de recuperación es eh es pequeña muchos sobreviven
pero no llegan a formar el caño forman el caño más bien eh con lo cual
bueno pues aquí eh todavía no tenemos resultados utilizados En cuanto a
las parcelas de ensayo eh llevan pues un año instaladas eh desde diciembre
2008 marzo 2009 una es en Monteseixo es un clima eh atlántico y la otra es
en Orense la supervivencia ha sido eh un poco mejor en el atlántico de
80,5 y del 75 en las zonas más continentales eh y bueno finalmente eh dar
los créditos de los participantes que han colaborado con nosotros que son
Instituto de Investigaciones Agrobiológicas de Valencia eh Instituto de
Conservación y colaborando en la caracterización eh del Departamento de
Biología Objetal de la Universidad de Santiago eh primero Antonio Baizer
el segundo eh Victoria González eh puesta a punto de clones de la
caracterización de clones resistentes por los microsatélites y por
último la Estación Fitopatológica de Areno eh de la Diputación de
Pontevedra en cuanto a y pues en el futuro estamos eh trabajando en la
mejora de la multiplicación in vitro por métodos de inmersión temporal
transitoria en vez de proporcionar eh los medios de cultivo en estado
semisólido o sólido eh sería en estado líquido eh facilitando pues la
la separación en en este proyecto se llama BioFROM eh estamos trabajando
en la protección de de la obtención vegetal y de su inclusión en el
catálogo con la elaboración de las fichas y bueno pues este trabajo ha
sido financiado parcialmente y bueno finalmente dar las gracias y decir que
para cualquier cuestión eh aquí pues podéis contar con nosotros y sobre
todo eh a través de mi menino sub 3 muchas gracias muchas gracias
Francisco por la brevedad vamos a dejar un como las ponencias son muy
diferentes vamos a hacerle las preguntas ahora si tenéis alguna pregunta y
luego ya terminamos con la última ponencia sobre García ¿alguna
pregunta? ¿podéis pasar por favor el micrófono? si podemos cada uno más
un correo no ni idea yo supongo porque no soy sí yo pienso que más bien
serían trabajos de este tipo que en cualquier caso y eh y respecto al tema
de si precisamente lo que hemos querido hacer con de pues que yo sepa los
tratamientos que hay podrían ser las en relación con que hay varios
flores distintos produciendo y enviando higueros yo creo que no es la
pregunta y luego por ahí noticia eh se están repasando todos los trabajos
ambos madres de Castaño de Valencia confirmando la identificación de de
cara a que supongo que eso ha sido consecuencia de algún caso con lo cual
eh bueno pues en ese sentido me parece que me parece que la la la la le y