Mirad, ¿qué es lo que teníamos que tener en cuenta con respecto a este
estudio? El título ya nos indica a grandes rasgos qué es lo que se ve en
el estudio y es que la dopamina en el estriado dorsal induce una
hipoactivación de frontocortical y atenúa las conductas de ansiedad y
compulsivas en ratas. Es lo que estudian. Entonces, ¿cómo lo hacen? Lo
hacen mediante una… Antes de nada, ¿qué disciplina de la psicobiología
podría encajar con este tipo de experimentos? Lo vimos, la psicología
fisiológica. ¿Os acordáis? Con una intervención, por lo tanto,
somática. Se interviene sobre el sistema nervioso y se estudia a ver qué
resultado hay. Yo modifico el sistema nervioso y mira a ver qué ocurre. De
acuerdo, miro, por lo tanto, la variable dependiente será la conducta. La
independiente la manipula. La manipulación que yo hago del sistema
nervioso central. Eso a grandes rasgos, ¿de acuerdo? Entonces, se estudia
un circuito que es el corticostriado talámico-cortical que sabemos que su
neurotransmisión está exacerbada en algunos trastornos, sobre todo en
trastornos de ansiedad. Y también te menciona la hipotermia, pero te
menciona sobre todo el trastorno asesino compulsivo como uno de ellos que
se sabe que está actuando. Entonces, lo que buscan es saber, porque se
sabía previamente que la dopamina, regulaba de alguna manera, variaba la
dopamina en función de cómo estaba la actividad de ese circuito. Pero no
se sabe exactamente qué es lo que hacía la dopamina. Si la dopamina era
la consecuencia de esa activación de ese circuito o era la causa de esa
activación o hipoactivación de ese circuito. Entonces, lo que buscan es
una técnica que, en este caso, mediante quimio-genética, pues pueda
darnos una herramienta, puede darles a los investigadores una herramienta
que permita hacer que las neuronas de la sustancia negra que sabemos que
liberan dopamina en el estriado dorsal que forma parte de ese circuito
corticostriado-calámico-cortical, cuando yo le dé un medicamento, haré
que las neuronas de la sustancia negra emitan su potencial de acción y
liberen dopamina en el estriado dorsal. Y ya entonces veré qué hace esa
liberación de dopamina. Esa manipulación genética la hago con un vector
viral. Es decir, el vector significa que es el que transporta. Entonces,
ese gen que quiero, que expresen las neuronas de la sustancia negra, cuando
se expresa, se fabrica un receptor al cual se acopla el fármaco para
activar el disparo de esa neurona, que es lo que yo quiero hacer. Entonces,
en ratas que solamente van a expresar ese gen en las neuronas
dopaminérgicas porque va a tener una modificación genética a estas
ratas, que son las ratas con CRE-TH, que, por lo tanto, el sistema en el
que yo voy a hacer que el virus enganche su material genético en un trozo
de su ADN, va a estar asociado a ese trozo de ADN. Va a buscar el virus, va
a entrar por el botón terminal, por eso lo meto en el estriado dorsal, y
va a viajar retrógradamente. Por eso se dice que el virus se transduce
retrógradamente porque viaja retrógradamente por el axón hasta el soma y
se va a introducir solamente en las neuronas, fíjate, que expresen, y por
lo tanto son estas ratas modificadas, estas dos secciones que son los
oxígenos, y en medio de estas dos secciones se introducirá el virus que
lleve, vamos, el gen que porte mi virus. Esa es la idea. Entonces voy a
tener dos tipos de virus. Uno que va a llevar un CHERRY, que es el gen
reportero, y otro que va a llevar el CHERRY más el gen que va a dar lugar
a ese interruptor que le vamos a llamar DRE, que es el interruptor. De
manera, fijaos, que luego cuando yo le dé el medicamento, el CENEO,
solamente a estas del DRE que van a expresar este receptor son las que
haré que disparen. Estas no van a expresar receptor ninguno, ¿de acuerdo?
Simplemente son el control para ver que el mero hecho de inyectarles el
virus, que el virus se les meta aquí a esas ratas, tengan una
manipulación genética previa, que eso no altere la conducta directamente,
¿entendéis? Es el control, porque alguien podría decir, si no tengo uno
solo con CHERRY con modificación genética, esto que estás viendo no es
tu interruptor molecular, es el jaleo que les has hecho al meterle el
CHERRY. No, aquí tengo unas que prueban que meto el virus exactamente
igual y no hacen lo que la Gualtide, ¿entendemos? Esa es la idea que
tengo. Entonces, con los experimentos que tengo de quimio-genética lo que
hago es comprobar que realmente esto se expresa, esa CHERRY, porque me da
una fluorescencia de color cereza, miro dónde se da esa fluorescencia de
color cereza, veo que se da solamente en la sustancia negra, veis que no se
da en el área terminal ventral que está al lado, que también es
dopaminérgico, con lo cual me aseguro que ese pinchazo del virus, ha
estado muy bien en el estirado dorsal, porque si hubiese estado en
ACUMBENS, se estaría expresando aquí, el ACUMBENS es el estirado ventral,
¿entendemos cuál es? Y veo que dónde están neuronas dopaminérgicas,
que veo que es sustancia negra y área terminal ventral, con un anticuerpo
que me da señal luminosa y que solamente se une a la tirosina hidroxilasa,
por lo tanto son neuronas dopaminérgicas. Y veo en la unión de ambas
imágenes que hay dobles positivos que son neuronas, por lo tanto
dopaminérgicas las que expresan el CHERRY, ya está, eso es lo que veo
aquí. Luego cuando hago las pruebas de conducta, lo que voy a ver, por lo
tanto es que tengo cuáles son las variables independientes en las pruebas
de conducta, las variables independientes son las que he dicho antes, el
tipo de rata, una variable independiente, que tengo tres tipos, wild type,
CHERRY que es el control de manipulación genética sin receptor y las que
tienen manipulación genética con receptor que son sobre las que tiene que
actuar mi llave molecular, mi interruptor celular, que he metido, que son
las tres. Entonces esa es una variable independiente, la otra variable
independiente sería CNO o no CNO, es decir darle el medicamento o no darle
porque lo que voy a hacer en cada grupo es comparar qué ocurre cuando no
le doy el medicamento y cuando le doy el medicamento. En las ratas wild
type y en las de CHERRY no tiene que pasar nada cuando les doy el
medicamento puesto que les doy una dosis suficientemente pequeña como para
que solamente actúe sobre aquellas que expresan el receptor paracetamol,
para el CNO, que no van a ser ni las wild type ni las CHERRY. Entonces ese
es el control para que me asegure yo que lo que ocurre es aquí. Y entonces
lo que hago es medir en conducta mediante dos paradigmas, uno es el del
campo abierto en el que miro el movimiento en el campo abierto, recordad
cuanto más pegado a las paredes te muevas más ansioso estás, cuanto más
relajado más te pones a la vista de los depredadores, más ocupas el
centro, recorres más espacio, estás más activo, no estás asustado y
encogido y escondido. También con algunas conductas que tienen becarios
entrenados para ir midiendo las conductas estas son los vídeos de la rata,
una es la de REYRING, en la que la rata cotillea sobre las dos patas
traseras llevándose sobre las dos patas traseras y otra que es una medida
de alfinejado de conducta compulsiva que es la del GROOMING, el
afincalamiento del tocarse los bigotes compulsiva. Veo que en todos los
casos mi manipulación genética cuando le doy el medicamento y por lo
tanto hago que la sustancia negra libere dopamina en el estriado dorsal lo
que veo es que se produce un ansiolisis que es lo que nos está contando.
Entonces se reducen las conductas ansiosas y se aumentan las conductas
relajadas, por así decirlo. Luego miro otro fenómeno que sé que también
afecta a la alteración de ese circuito corticostriado-calámico-cortical y
que sé que es un error, es un fenómeno que no funciona bien en pacientes
con esquizofrenia y en pacientes con trastorno obsesivo compulsivo entre
otras cosas. Que es el tema de la inhibición prepulso que es el tema de
ese de darle un sustillo antes avisarle que cuando te dan un susto te
sobresaltan más que cuando te avisan de que te van a dar un susto y luego
te asustan. Ya está. Entonces, a la gente que tiene esas patologías no le
funciona bien esa inhibición prepulso y lo que ven aquí es que cuando dan
CNO solamente ven variación en un grupo o sea que los machos y las hembras
se sobresaltan de manera distinta pero tu manipulación del medicamento y
de tu llave solamente la encuentras en un grupo de ratas y a un nivel de
decibelios que sea aún así lo cuentas como que es un hallazgo de la
leche. Bueno, pues ellos sabrán y los referís que les hacen caso lo
verán. Y lo último que hacen es ver a ver esa liberación de acúmbens
que sea ahí que se produce un ansiolisis cómo afecta a las distintas
zonas de tu cerebro en cuanto a la cantidad de actividad y eso cuadra con
una hipoactividad en la zona de córtex prefrontal fundamentalmente córtex
prefrontal medial y órbito frontal que es la parte que está encima de las
órbitas y eso se ve en estas imágenes que nos muestran que no se ve muy
bien aquí como vemos esta es la línea base la decenio y como nos había
dicho Rómulo muy bien estas son lo que se ve aquí iluminado son aquellas
que en línea base tienen más actividad que cuando les doy el medicamento
es decir, cuando liberan dopamina en el estriado dorsal bajan su actividad
que es lo que nos dice el título que produce hipoactividad frontocortical
luego este aumento de actividad en el cerebelo parece que no es
estadísticamente significativo aunque sí se ve y también nos cuentan que
hay un aumento una disminución de actividad perdón, en el estriado dorsal
que no llega a ser estadísticamente significativo pero nos lo comentan eso
es lo que dicen luego con respecto lo último que hacen además es una
espectroscopía por resonancia magnética que es un análisis del espectro
luminoso igual que hacen los astrónomos cuando ven una estrella y depende
de la luz que les llega saben qué composición química tiene esa estrella
si es el que está quemando si es hidrógeno, si no sé qué o un planeta y
miran si hay carbono o qué hay en esa atmósfera pues esto lo hacen igual
con dos zonas el córtex prefrontal y el estriado dorsal de mi rata red
porque son las que ya estoy mirando yo aquí qué es lo que ocurre comparo
la rata red con la cherry nada más y veo que esto cuadra con un aumento de
glutamato en el estriado dorsal y en el córtex prefrontal que como luego
te cuentan en la en la discusión pues cuadra con lo que se había visto
que era el efecto justo contrario una hiperactivación del del córtex
prefrontal en los trastornos obsesivos compulsivos que comentan que había
una hiperactivación del córtex prefrontal y un descenso del glutamato con
lo cual lo que hemos visto aquí es exactamente lo contrario que es lo que
se produce con la liberación de de dopamina desde la sustancia negra en el
estriado dorsal esa es la base y eso da base a que luego pues como veis
busquen medicamentos más concretos que vayan a ese subtipo de receptores
que se supone que es el que expresan las medium spinning neuron de aquí es
decir que esto como todo es para buscar y comprender bien cómo funcionan
pero es un estudio que luego como veis tiene 14 ratas o sea esto, luego
habrá otros que lo replicarán que tendrán que hacer otras cosas así
también ocurre etcétera etcétera es el primer granito de arena de todo
un proceso la investigación científica y hasta aquí hemos llegado pero
por cierto la semana que viene es semana santa ¿no? bueno pues nos vemos
después si alguno no estáis apuntados a la app 4 y os tenéis que apuntar
sabéis que aquí tenéis las tres listas las de sin preferencia y los dos
días de posible actividad ¿de acuerdo? muchas gracias a todos vamos a
cortar la grabación que luego dura horas quiero ver dónde me anotaste
¿dónde te anotaste?